Alethia™ C. difficile

Prueba de amplificación de DNA para la detección de C. difficile citotoxigénico en muestras de materia fecal:

RESUMEN Y EXPLICACIÓN DE LA PRUEBA

La prueba de amplificación de DNA Alethia C. difficile se basa en la tecnología de amplificación isotérmica de lazo-mediado que utiliza cebadores diseñados específicamente para el locus de patogenicidad PaLoc, con el objeto de proporcionar una amplificación isotérmica de DNA continua y específica. Un producto intermediario de esta amplificación es la formación de pirofosfato de magnesio, que forma un precipitado blanco que confiere turbidez a la solución de reacción. La presencia de turbidez significa que la reacción es positiva, mientras que la ausencia de turbidez significa que la reacción es negativa.

La prueba Alethia C. difficile contiene cebadores que amplifican específicamente una región de 204 pb en la secuencia conservada 5’ del gen tcdA, dentro del PaLoc, en el C. difficile toxigénico, en muestras de materia fecal diarréica de pacientes que se sospecha que tienen diarrea asociada con C. difficile (CDAD en inglés). Los resultados de la prueba se determinan mediante el Incubador / Lector Alethia de Meridian.

El kit de ensayo molecular de ADN del Alethia C. difficile incluye un ensamble para preparar las muestras y un Dispositivo para la Prueba. El Ensamble para preparar las muestras, utilizado para la dilución y preparación de la muestra, se llena con solución salina tamponada con fosfato y Staphylococcus aureus tratado con formol. El dispositivo de prueba del Alethia C. difficile contiene una liosfera de reactivo seco en cada una de las dos cámaras; una cámara de TEST con cebadores específicos para C. difficile y una cámara de CONTROL con cebadores específicos para S. aureus. Juntos, el Staphylococcus aureus tratado con formol en el Ensamble para preparar las muestras y los cebadores específicos para el S. aureus en la liosfera de la cámara de CONTROL, funcionan como control interno para el ensayo del Alethia C. difficile.

Cada una de las muestras del paciente se añade al Ensamble para preparar las muestras mediante una Escobilla para la recolección de muestras. La muestra del paciente se diluye en solución salina tamponada con fosfato y Staphylococcus aureus tratado con formal, combinando el C. difficile presente en la muestra del paciente con S. aureus. La muestra del paciente y el blanco de control S. aureus se procesan en paralelo mediante los pasos restantes de la preparación de la muestra y mediante el procedimiento de la prueba . El control interno monitoriza la inhibición de la amplificación, el rendimiento de los reactivos del ensayo y la eficacia del procesamiento de la muestra. El blanco de ADN del S. aureus del control debe amplificarse y detectarse en la reacción final, o la prueba se considerará no válida, y no se darán a conocer los resultados del paciente

Plataforma molecular Alethia™ incluye

Cat. 610172 Alethia™ Incubator/Reader

Cat. 610173 Printer

Cat. 610174 Keyboard

Cat. 610169 Workstation